ELISA實驗前準備有哪些?

    恒遠生物溫馨提醒廣大科研者：做實驗前都必須做好充足的準備（試劑準備、實驗儀器準備、樣本準備、實驗參與人員指標等等）。本周我司技術人員就ELISA實驗的準備工作提供詳細的介紹說明。一起來看看！



    為了使最終的ELISA實驗結果就要較高的可靠性，應在實驗開始前必須做好的前期準備工作包括對實驗所需的儀器進行質控。使儀器保持好的工作狀態，應建立維護和校正儀器的標準操作程序，常見的需要控制的儀器包括：移液器（加樣槍）、溫箱、洗板機和酶標儀。具體質控操作請參考如下要求：


    移液器： ELISA加樣量小（20-200μl），其準確性直接影響實驗結果，利用稱重法檢查：低、中、高三個刻度分別吸取指示量的水，萬分之一天平稱重后計算吸量是否準確，一般應在±5%以內。


    恒溫箱： 經常檢查恒溫箱溫度計所示的溫度和水中（或溫箱內）實測溫度是否一致，允許有±1℃的誤差。


    洗板機： 每個廠家設置洗板后的殘留液有各自的規定，一般不超過2μl；人工扣板時，墊紙不濕；定期檢查管孔是否堵塞。


    酶標儀：經常維護其光學部分，防止濾光片霉變，定期檢測校正，使其保持良好的工作性能。


    ELISA實驗有檢測人的，也有檢測各種動物、植物的某個指標，甚至老師在設計實驗課題時會要求同時檢測多個指標。那么需要的樣本量取決于你的檢測項目,有些檢測項目需要血清做1:100稀釋, 甚至是更高的稀釋度,那么幾微升血樣就夠了,有些項目只能做較低的稀釋，甚至不稀釋，這樣的話每孔會需要100 ul 左右。zui少的盒子需要10ul，有的需要50，多的需要100。


    大多數試劑盒的細胞因子檢測是要稀釋的，稀釋的倍數各有不同。你的檢測指標要用多少，如果你能要到試劑盒的說明書，就能確定；如果不能確定用什么試劑盒，建議你每個指標留100ul的血清（血漿、組織勻漿、腦脊液、尿液等其他相關液體樣本）應該可以的，采集樣本時如果樣本充裕，建議您可以用兩支試管分裝樣本，以便實驗完成后需進一步實驗問題分析。關于抗凝血和得到的血清血漿體積的關系,大致上比例是1毫升全血可以得到500 ul 血清或血漿。


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