ELISA實驗關鍵注意要點！

上海恒遠生物科技有限公司成立于2010年12月，集研發、生產、銷售為一體，以科研試劑生產、診斷試劑原料供應生產為核心，致力于為全球來自高等院校、科研機構、診斷試劑生產廠家以及生物制藥公司的廣大客戶們提供高質量生物產品。恒遠生物現擁有各物種基因產品50余萬種；重組蛋白20余萬種；數十個種屬的多克隆抗體3萬多種和高質量單克隆抗體數百種。恒遠品牌自主研發ELISA試劑盒，現已涵蓋20多個種屬，數千種產品，涉及腫瘤、激素、自身免疫、心血管、代謝等十多個研究領域。恒遠生物為大家總結，ELISA試劑盒實驗時至關重要的步驟有：



一、重要的洗滌：
不充分的洗滌會導致差異和高背景，從而帶來不理想的實驗結果。如果未結合的材料殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音。有必要的話，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會阻止非特異結合反應。如果背景過高，懷疑洗滌不夠時，可以嘗試增加洗滌次數。


二、關鍵的封閉：
封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位點。這就降低了可產生信號的抗體非特異結合的機會。如果背景過高，懷疑封閉不充分，那么可以嘗試使用更高濃度的封閉液，或適當延長封閉時間。目前主要有兩種類型的封閉液：蛋白和非離子型去污劑。使用的類型須取決于多個因素，包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的封閉液應降低非特異性結合，但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發生相互作用。


三、抗體濃度須優化：
如果試劑稍有不同，則可能需要優化抗體的量。非特異的抗體結合會增加背景。為了防止這一點，切勿使用過多的一抗或二抗。


四、檢測試劑要適量：
切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高，或者未正確稀釋，則會導致高背景。ELISA試劑盒也不要顯色過度，如有必要，優化一下何時應加入終止液。只有確保每一步操作都做到位，才會呈現好的實驗結果。所以ELISA實驗的每一步都很重要，不可以掉以輕心。


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